通常所说的Th1、Th2是指在各种生理与病理条件下有能力分化为Th1、Th2的辅助性T细胞(严格意义上是 Th0)。静息状态 (未受任何刺激,如人的正常生理状态)下,Th0分化为Th1、Th2的能力非常弱;当受到外界因素(如刺激素、病原体等)刺激,Th0即会向Th1、Th2等Th细胞分化,此时,通过检测分泌的细胞因子实现对各类Th细胞的检测。正常情况下机体中Th1和Th2处于相对平衡的状态,当这种平衡打破时可能引起多种疾病的发生,如肿瘤、自身免疫性疾病等。
• Th1:分泌 IFN-γ、IL-2、TNF-α 等细胞因子,主要介导细胞免疫应答,调节细胞毒性T细胞分化;
• Th2:分泌 IL-4、IL-10、IL-13 等细胞因子,主要介导体液免疫,促进B细胞增殖、分化和产生抗体。
Beadstar-mPlex Th1多细胞因子检测试剂盒
检测细胞因子:IFN-γ、IL-2、TNF-α
(根据实验的需要,在人IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α、IFN-γ、IL-1β、IL-5、IL-8、IL-12p70、IFN- α2,以及小鼠IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、MCP-1、IFN-γ、TNF-α、IL-12p70、IL-1β,中选择需要检测的细胞因子种类和数量,自由组合)
检测方法:流式荧光法
样本:细胞培养上清、血清
所需样本量:血清(5-10 微升);细胞上清(25-50 微升)
适应机型:通用性强,普通流式机型均可检测
检测原理
。本试剂盒以流式分析为基础,检测原理如图1所示,在特定荧光编码的微球上分别连接对应的人细胞因子抗体用于捕获溶液中的细胞因子。当检测样品中存在这些细胞因子时,这些连接荧光编码微球的捕获抗体将会与其结合,最后通过加入藻红蛋白(PE)标记的特异性检测抗体,形成微球连接的捕获抗体-抗原-PE标记的检测抗体复合物。在流式细胞仪藻蓝蛋白(APC)和藻蓝蛋白-Cy7(APC-Cy7)通道下,12群微球被识别并用于判定抗原(图2);在流式细胞仪PE通道下,微球体上PE的荧光强度与样本中各被检测物的浓度呈正相关,各校准品与其对应的荧光信号可拟合成浓度—荧光强度标准曲线,通过曲线方程可计算出各抗原的浓度。
图1流式荧光法高通量检测细胞因子原理示意图(以6细胞因子检测为例)
图2. 各微球对应的细胞因子
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